HT115(DE3)感受態(tài)細(xì)胞

關(guān)于培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入培養(yǎng)基的量的問(wèn)題。
這個(gè)是要靠自己去摸索你所養(yǎng)的細(xì)胞的。并不是小的玻璃方瓶12ml，大方瓶14ml的。有些細(xì)胞反而是培養(yǎng)基少一點(diǎn)相反細(xì)胞形態(tài)會(huì)長(zhǎng)得比較好。（可能也是競(jìng)爭(zhēng)很大，有優(yōu)勝劣汰吧。呵呵。）對(duì)于生長(zhǎng)速度快的細(xì)胞，易生長(zhǎng)的細(xì)胞加少一點(diǎn)培養(yǎng)基細(xì)胞形態(tài)會(huì)更好。但是要注意換液掌握。
關(guān)于選擇培養(yǎng)瓶的問(wèn)題。
個(gè)人發(fā)現(xiàn)生長(zhǎng)速度快的細(xì)胞在玻璃瓶?jī)?nèi)生長(zhǎng)的狀態(tài)會(huì)比一次性塑料瓶相對(duì)好一些。而對(duì)于同一種細(xì)胞，在其生長(zhǎng)旺盛快速的時(shí)期在玻璃瓶?jī)?nèi)的生長(zhǎng)狀態(tài)也比塑料瓶?jī)?nèi)好。這可能是因?yàn)樗芰掀勘炔Ａ扛菀踪N壁。生長(zhǎng)速度快的細(xì)胞在塑料瓶這種相對(duì)“更安逸”的環(huán)境里反而長(zhǎng)得狀態(tài)不如玻璃瓶好。
所以對(duì)于生長(zhǎng)速度慢的細(xì)胞如果想要更漂亮的細(xì)胞狀態(tài)，塑料瓶比玻璃瓶會(huì)好，對(duì)于生長(zhǎng)速度慢的細(xì)胞，玻璃瓶則會(huì)更好。同樣，對(duì)于同一種細(xì)胞，在其生長(zhǎng)速度慢的時(shí)候，塑料瓶會(huì)好一點(diǎn)，比如剛剛復(fù)蘇的時(shí)候，或者原代培養(yǎng)的時(shí)候。而在其生長(zhǎng)旺盛的時(shí)候，玻璃瓶則相對(duì)會(huì)好一點(diǎn)。

HT115(DE3)感受態(tài)細(xì)胞

消化/傳代。

1、移去MEF培養(yǎng)基

2、用5ml不含鈣鎂離子的PBS洗滌細(xì)胞(以去除胰蛋白酶的抑制物)。

3、每個(gè)培養(yǎng)瓶里加入1.5ml的胰蛋白酶/EDTA(0.05%的胰蛋白酶)，消化5min。

4、為了使細(xì)胞分散開(kāi)，輕輕吹打細(xì)胞。

5、每加入1ml的胰蛋白酶/EDTA，加入至少1ml的MEF培養(yǎng)基以終止胰蛋白酶的消化。

6、將細(xì)胞懸液加入到15ml的錐形管中，吹打幾次，使細(xì)胞分散為單個(gè)的。

7、在新的T75培養(yǎng)瓶中加入10mlMEF培養(yǎng)基。

8、將細(xì)胞懸液分裝到新的T75培養(yǎng)瓶中，放在37℃培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

相關(guān)產(chǎn)品列表：

MIC-iCell-d012    結(jié)腸平滑肌細(xì)胞    5x105
MIC-iCell-d013    結(jié)腸成纖維細(xì)胞    5x105
MIC-iCell-d014    膽囊上皮    5x105
MIC-iCell-d015    肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞    5x105
MIC-iCell-d016    肝外膽管上皮細(xì)胞    5x105
MIC-iCell-d017    肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞    5x105
MIC-iCell-d018    肝星狀細(xì)胞    5x105
MIC-iCell-d019    肝竇內(nèi)皮細(xì)胞    5x105
MIC-iCell-d020    肝kuffer細(xì)胞    5x105
貨號(hào)    細(xì)胞名稱    細(xì)胞數(shù)
MIC-iCell-u001    腎小管上皮細(xì)胞    5x105
MIC-iCell-u002    腎系膜細(xì)胞    5x105
MIC-iCell-u003    腎小球內(nèi)皮細(xì)胞    5x105
MIC-iCell-u004    腎小球足細(xì)胞    5x105
MIC-iCell-u005    輸尿管上皮細(xì)胞    5x105
MIC-iCell-u006    輸尿管平滑肌細(xì)胞    5x105
MIC-iCell-u007    膀胱上皮細(xì)胞    5x105
MIC-iCell-u008    膀胱平滑肌細(xì)胞    5x105
MIC-iCell-u009    膀胱基質(zhì)成纖維細(xì)胞    5x105
MIC-iCell-u010    前列腺上皮細(xì)胞    5x105
MIC-iCell-u011    前列腺成纖維細(xì)胞    5x105
貨號(hào)    細(xì)胞名稱    細(xì)胞數(shù)
MIC-iCell-g001    甲狀腺上皮細(xì)胞    5x105
MIC-iCell-g002    甲狀腺成纖維細(xì)胞    5x105
MIC-iCell-g003    胰腺星狀細(xì)胞    5x105

貨號(hào)    細(xì)胞名稱    細(xì)胞數(shù)

MIC-iCell-m004    晶狀體上皮細(xì)胞    5x105
MIC-iCell-m005    結(jié)膜成纖維細(xì)胞    5x105
MIC-iCell-m006    結(jié)膜上皮細(xì)胞    5x105
MIC-iCell-m007    脈絡(luò)膜微血管內(nèi)皮    5x105
MIC-iCell-m008    脈胳膜成纖維細(xì)胞    5x105
MIC-iCell-m009    視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮    5x105
MIC-iCell-m010    牙周膜成纖維細(xì)胞    5x105
MIC-iCell-m011    牙周膜干細(xì)胞    5x105
MIC-iCell-m012    牙髓細(xì)胞    5x105
MIC-iCell-m013    口腔黏膜上皮細(xì)胞    5x105
MIC-iCell-m014    舌表皮細(xì)胞    5x105
MIC-iCell-m015    鼓膜上皮干細(xì)胞培養(yǎng)    5x105