Becker細(xì)胞，星形細(xì)胞瘤分級(jí)IV細(xì)胞

Becker細(xì)胞系 復(fù)蘇實(shí)驗(yàn)室直銷(xiāo)
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
常見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)中一些問(wèn)題總結(jié)：1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適？血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源，所以血清的含量多少會(huì)對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%，不要低于5%或高過(guò)20%，因?yàn)楹窟^(guò)低會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)不足，過(guò)高則會(huì)破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%，可以適量加減；2)何時(shí)須更換培養(yǎng)基？視細(xì)胞生長(zhǎng)密度而定，或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時(shí)間，按時(shí)更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進(jìn)行更換；3)購(gòu)買(mǎi)的復(fù)蘇細(xì)胞，為何會(huì)有脫落？因?yàn)檫\(yùn)輸?shù)倪^(guò)程中不可避免的會(huì)有震蕩，收到后可以離心收集；4)購(gòu)買(mǎi)的細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會(huì)發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少，大都是因?yàn)殡x心過(guò)程操作上的失誤，造成細(xì)胞的物理性損傷，以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心，應(yīng)待細(xì)胞生長(zhǎng)隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；5)購(gòu)買(mǎi)的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因？研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳，常見(jiàn)原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過(guò)程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后，加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于–80°C太久；6)收到的冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng)，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動(dòng)或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí)，均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
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細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞形態(tài)特性：成纖維細(xì)胞
Becker細(xì)胞，星形細(xì)胞瘤分級(jí)IV細(xì)胞

解凍細(xì)胞出現(xiàn)大量細(xì)胞碎片的可能原因及推薦解決方案如下：1)冷凍時(shí)細(xì)胞密度過(guò)低：推薦的解決方案：縮短解凍過(guò)程中的時(shí)間。將細(xì)胞取出后，立即將凍存管浸入在37℃的水浴中，并震蕩至全部融化，然后迅速地轉(zhuǎn)移到預(yù)熱的培養(yǎng)基中；2)不適當(dāng)?shù)睦鋬鲞^(guò)程：推薦的解決方案：解凍不同冷凍室總的試管。確保在凍存過(guò)程中采用的適當(dāng)?shù)募夹g(shù)，并確保使用了適量和適合的冷凍液。出現(xiàn)生長(zhǎng)緩慢的可能原因及推薦解決方案如下：1)培養(yǎng)瓶的大小：一般解決方案是一些細(xì)胞在培養(yǎng)基中傾向于維持一定的密度。將培養(yǎng)物轉(zhuǎn)移到較小的培養(yǎng)瓶中，使細(xì)胞密度上升；如，根據(jù)培養(yǎng)基的體積，從T75培養(yǎng)瓶轉(zhuǎn)移到2或3個(gè)T25培養(yǎng)瓶中；2)細(xì)胞密度過(guò)低：通常解決方案是提高未來(lái)冷凍物種細(xì)胞的凍存密度，或使用較小的培養(yǎng)容器，或解凍多個(gè)試管來(lái)進(jìn)行培養(yǎng)。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：1ml凍存管(兩支)
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細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
以下對(duì)初次培養(yǎng)細(xì)胞人員來(lái)說(shuō)，是非常好的開(kāi)門(mén)教程：準(zhǔn)備室的設(shè)備：?jiǎn)握麴s水蒸餾器、雙蒸餾水蒸餾器、酸缸、烤箱、高壓鍋、儲(chǔ)品柜(放置未消毒物品)、儲(chǔ)品柜(放置消毒過(guò)的物品)、包裝臺(tái)；配液室的設(shè)備：扭力天平和電子天平(稱(chēng)量藥品)、PH計(jì)(測(cè)量培養(yǎng)用液PH值)、磁力攪拌器(配置溶液室攪拌溶液)；培養(yǎng)室的設(shè)備：液氮罐、儲(chǔ)品柜(存放雜物)、日光燈和紫外燈、空氣凈化器系統(tǒng)、低溫冰箱(-80℃)、空調(diào)、二氧化碳缸瓶、邊臺(tái)(書(shū)寫(xiě)實(shí)驗(yàn)記錄)；必須放在無(wú)菌間的設(shè)備：離心機(jī)(收集細(xì)胞)、超凈工作臺(tái)、倒置顯微鏡、CO2孵箱(孵育培養(yǎng)物)、水浴鍋、三氧消毒殺菌機(jī)、4℃冰箱(放置serum和培養(yǎng)用液)。無(wú)菌室的滅菌：定期打掃無(wú)菌室：每周打掃一次，先用自來(lái)水拖地、擦桌子、超凈工作臺(tái)等，然后用3‰來(lái)蘇爾或者新潔爾滅或者0.5％擦拭；CO2孵箱(培養(yǎng)箱)滅菌：先用3‰新潔爾滅擦拭，然后用75％酒精擦拭或者0.5％，再用紫外燈照射；實(shí)驗(yàn)前滅菌：打開(kāi)紫外燈、三氧殺菌機(jī)、空氣凈化器系統(tǒng)各20-30分鐘；實(shí)驗(yàn)后滅菌：用75％酒精(3‰新潔爾滅)擦拭超凈臺(tái)、邊臺(tái)、倒置顯微鏡的載物臺(tái)；實(shí)驗(yàn)人員的無(wú)菌準(zhǔn)備：肥皂洗手、穿好隔離衣、帶好隔離帽、口罩、放好拖鞋、用75％酒精棉球擦凈雙手。
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細(xì)胞傳代方法：1：2傳代